AMPLIFIKASI GEN PENYANDI DNA POLIMERASE I TERMOSTABIL DARI Brevibacillus sp ASAL KAWAH SIKIDANG DIENG
Senin, 10 September 2012 02:41

ABSTRAK

DNA polimerase termostabil memiliki peran penting dalam penelitian biologi molecular, yaitu untuk mengamplifikasi DNA dalam proses polymerase chain reaction (PCR). DNA polimerase termostabil diekspresikan oleh mikroorganisme termofilik. Bakteri termofilik Brevibacillus sp. berhasil diisolasi dari sumber air panas kawah Sikidang Dieng, Jawa Tengah. Penelitian awal menunjukkan bahwa crude protein dari isolat Brevibacillus sp. diketahui dapat digunakan dalam PCR. Seperti halnya enzim termostabil alamiah, DNA polimerase pada isolat disintesis dalam jumlah yang sedikit dan membutuhkan teknik purifikasi yang rumit. Tujuan penelitian ini adalah melakukan isolasi gen DNA polymerase dari Brevibacillus sp. Penelitian diawali dengan melakukan amplifikasi bagian gen DNA polimerase pada genom isolat menggunakan primer spesifik. Fragmen yang teramplifikasi kemudian diisolasi, dimurnikan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa gen DNA Pol I termostabil berhasil diamplifikasi dari DNA genom Brevibacillus sp menghasilkan fragmen berukuran ± 2,7 kb.

Kata kunci : DNA Pol I termostabil, PCR, Brevibacillus sp., termofilik,

ABSTRACT

Thermostable DNA polymerase has an important role in molecular biology research to amplify small amount of DNA through polymerase chain reaction (PCR). Thermostable enzymes are expressed by thermophillic microorganisms. Thermophillic bacteria Brevibacillus sp. has been isolated from Sikidang Crater, Dieng Plateu, Central Java. Previous study showed that crude protein of the isolate could be used in PCR. Unfortunately, like most native thermostable enzymes, the thermostable DNA polymerase of the isolate is synthesized in a very low level and therefore is cumbersome to purify. The purpose of this research is to clone thermostable DNA polymerase gene of the isolate. The DNA polymerase gene of the isolate was amplified by PCR method using spesific primers. The amplified fragment was then isolated, purified. The result showed that the DNA Pol I gene was successfully be amplified from the isolate DNA genom, resulting in ± 2,7 kb sequence in length.

Keywords : Thermostable DNA Pol I, PCR, Brevibacillus sp , thermophilic

 

File lengkap dapat diunduh di sini

 

Login Admin



Pengunjung

mod_vvisit_counterHari ini91
mod_vvisit_counterTotal253229

Online

Kami memiliki 5 Tamu online